TwistDx客户常见问题汇总--胜创
来自胜创生物
RPA Kit详解：
TwistAmp Basic基本组分：
96次冻干RPA小球真空包装（室温保数天不会改变活力）
TwistAmp 水化buffer
醋酸镁（280mM）
对照模板及引物mix
存贮：-20℃ 长期保存，6个月内保证完整活性。
检测方法：
末段检测：凝胶电泳，三明治法如侧向流检测；
基于探针的荧光检测。
反应条件：
反应参数受组分浓度，最大产物长度，反应温度，动态变化。
为了便于客户使用，TwistDxAmp试剂盒反应条件可由客户自行优化。
常规条件如下：
1 绝大多数快速检测10-12min
2 500bp以下扩增长度
3 适用温度37-42℃
如改变扩增条件，可减缓反应速度，更适用于定量检测，更长的扩增片段（长达2kb），明显降低反应温度。
TwistAmp系列扩增试剂盒组分：
TwistAmp RT Basic
除以上组分外，还加有通用的逆转录酶，但不含Rnase抑制剂。
TwistAmp Exo
除基本组分外，还含有内切酶3，减少扩增产物的末端拷贝量，所以不能用于电泳分析，但在RPA系统中产生更强的动态荧光信号，便于实时定量。
TwistAmp RT exo
除Amp Exo 的基本组分外，外加通用的逆转录酶，但不含Rnase抑制剂。
TwistAmp fgp
除了基本组分外，有一个高效的fgp核酶，在RPA反应过程中，此酶不会对末端输出拷贝有影响，所以不同于exo ，此试剂盒也可用于电泳分析。
TwistAmp nfo
末端三明治法快速检测，如侧向流试纸法
除基本组分之外， nfo核酶，和适合是LF 探针 形成新的聚合酶增强底物，无需任何仪器。本品可通过加入exo探针作为Amp exo kit的替代物，进行荧光定量检测，由于核酶延缓动态反应速度，可用于末端电泳检测。